1、是C2C12(也就是成肌细胞)。因为成肌细胞是在成人骨骼肌组织中发现的在创伤后重建肌肉组织的前体细胞,具有很好的分化能力,C2C12成肌细胞经常被用来作为在体外系统研究肌肉的发育和分化。
2、多能性细胞,这种细胞具有分化出多种细胞组织的潜能,但却失去了发育成完整个体的能力,发育潜能受到一定的限制,骨髓多能造血细胞是典型的例子,它可分化出至少十二种血细胞,但不能分化出造血系统以外的其它细胞。
3、体外无限扩增性是ESC研究和应用的前提和关键,这为ESC提供了无限的细胞来源。⑶可操作性。成体干细胞(adult stem cells,ASC)是指存在于一种已经分化组织中的未分化细胞,这种细胞能够自我更新并且能够特化形成组织的细胞。
4、C2C12细胞株 是YaffeD,SaxelO建立的小鼠成肌细胞系的亚株。该细胞分化较快,可形成能收缩的微管,产生特异的肌肉蛋白。在骨形态形成蛋白(BMP-2)的作用下,该细胞可由成肌细胞分化为成骨细胞。
5、其实发生肌卫星细胞被激活的时候。肌卫星细胞就像肌肉的干细胞一样,当它们被激活时,它们会帮助肌肉细胞增加核从而帮助肌原纤维的增长。 肌肉卫星细胞是骨骼肌中位于肌细胞膜和基膜之间的具有增殖分化潜力的肌源性细胞。
6、长期以来就被认为是出生后骨骼肌生长、修复和维持的单能成肌干细胞。近年研究发现,肌卫星细胞与内皮细胞共同起源于胚胎血管祖细胞,且成年骨骼肌中存在多能干细胞,这些肌源多能干细胞在适当的微环境中具有多向分化潜能。
电穿孔法。优点是转染效率特别高,但需要昂贵的电转仪,对不同的细胞可能会干扰细胞的代谢、钙离子浓度。血清的存在能显著提高转染效率。通过使用DMSO或甘油获得的渗透休克。
将C2C12成肌细胞用含不同浓度马血清的高糖DMEM培养基培养,收集细胞,在相差显微镜下观察形态变化,并通过免疫细胞化学(Imminocytochemistry,ICC)及RT-PCR方法分别检测肌性相关基因表达的改变。
组织块法:用锐利刀剪,组织块不必剪得很小,米粒大小即可,放置在6孔板内,一孔内5-6个组织块,加入少量液体,以组织块不漂起为宜,第三天换等量液体。
本部分实验以与心肌细胞结构相似且易于转染外源基因的小鼠成肌细胞C2C12为强制性表达外源性hhlim基因的细胞,观察hhlim基因表达产物的亚细胞定位及其在细胞肥大中的作用。
此外,同系小鼠脾细胞和胸腺细胞亦可作为饲养细胞。
是C2C12(也就是成肌细胞)。因为成肌细胞是在成人骨骼肌组织中发现的在创伤后重建肌肉组织的前体细胞,具有很好的分化能力,C2C12成肌细胞经常被用来作为在体外系统研究肌肉的发育和分化。
可能有多种原因: 目标蛋白对细胞有毒性,导致细胞死亡; 转染试剂以及DNA用量信息需要优化,否则对细胞具有伤害; 细胞贴壁转染之后没有正常换液。
可能存在以下原因:换液过程中对细胞造成机械性损伤:在换液过程中,如果操作不当,轻轻松松就能使细胞受到撞击和振荡,从而造成细胞膜破裂、细胞形态变形、细胞内部结构受损等影响。
细胞转染后,出现大量死亡现象的原因有:细胞状态欠佳,需调整细胞生长状态:一般处于良好生长状态的细胞对转染试剂有更好的耐受性。siRNA或者转染试剂浓度过高。转染试剂毒性较大,更换转染试剂。
细胞死亡的原因很多,齐氏生物细胞培养产品专家认为如培养环境不符合洁净度要求,培养基污染、血清污染、操作不当等都会导致细胞死亡。具体情况要看你具体培养的细胞及实验环境、手法而定。
细胞如果原先是在有血清培养基中进行培养的话,突然从有血清条件,换到无血清条件,确实会导致细胞状态不理想,甚至死亡。这时候换到无血清培养基的操作,就需要采用逐步替换的方法来使得细胞逐渐适应无血清培养基条件。
1、是C2C12(也就是成肌细胞)。因为成肌细胞是在成人骨骼肌组织中发现的在创伤后重建肌肉组织的前体细胞,具有很好的分化能力,C2C12成肌细胞经常被用来作为在体外系统研究肌肉的发育和分化。
2、C2C12细胞株 是YaffeD,SaxelO建立的小鼠成肌细胞系的亚株。该细胞分化较快,可形成能收缩的微管,产生特异的肌肉蛋白。在骨形态形成蛋白(BMP-2)的作用下,该细胞可由成肌细胞分化为成骨细胞。
3、用在分化型C2C12细胞中表达活性较高的pF5转染C2C12细胞,在用马血清诱导被转染细胞进行分化的同时,加入心肌细胞肥大刺激因子ET-1和bFGF,观察两种因素对报告基因表达的影响。
4、经过细胞分化,在多细胞生物体内就会形成各种不同的细胞和组织。例如,在动物胚胎发育过程中,红细胞和心肌细胞都是来自中胚层。但是,后来红细胞能够合成血红蛋白,而心肌细胞则能够合成肌动蛋白和肌球蛋白。
是C2C12(也就是成肌细胞)。因为成肌细胞是在成人骨骼肌组织中发现的在创伤后重建肌肉组织的前体细胞,具有很好的分化能力,C2C12成肌细胞经常被用来作为在体外系统研究肌肉的发育和分化。
其是难以转染的原代细胞。转染效率高,推荐QIAGEN的superfect转染试剂。 磷酸钙共沉淀转染。带正电的阳离子脂质体则不同、沉淀反应时间,经过内吞被导入细胞、细胞孵育时间乃至各组分加入顺序和混合的方式都可能对结果产生影响。
一般来说,分化了的细胞将一直保持分化后的状态,直到死亡。导言 细胞分化就是由一种相同的细胞类型经过细胞分裂后逐渐在形态、结构和功能上形成稳定性差异,产生不同的细胞类群的过程。
因此,基因调控是细胞分化的核心问题。特点 正常情况下,细胞分化是稳定、不可逆的。一旦细胞受到某种刺激发生变化,开始向某一方向分化后,即使引起变化的刺激不再存在,分化仍能进行,并可通过细胞分裂不断继续下去。
解离液就含有酒精,加酒精是为了是杀死细胞,起固定作用。而盐酸主要是溶解果胶,使细胞分散。所谓的时间过长后,是解离液使细胞死亡这句话还确实让人费解。