A549细胞为人肺腺癌细胞,属于传代细胞系,可稳定地传代培养。一般用胰酶消化后,加入生长液稀释,以1:2~1:3传代培养都是可行的。
所以我建议你加了胰酶(0.25%)后可以放在37度温箱里3-5分钟,自己掌握一下消化的时间,慢慢的你就能摸到最适合你条件的消化时间了。
把冻存细胞的管子在37’C 的水浴融化,快速摇动, 1分钟内使管内的细胞融化。把融化的管子浸入装有70 %乙醇的烧杯内,整个实验在超净台内进行。小心打开冻存管,不要让乙醇浸入管内。
1、结果: 与贴壁细胞相比,人肺癌细胞系A549肿瘤细胞球细胞具有较强的克隆能力,且高表达ABCG2,符合肺癌干细胞的特点,Id1在人肺癌细胞系A549肿瘤细胞球细胞中高表达。结论: Id1可能成为靶向肺癌干细胞肺癌治疗的靶点。
2、A549细胞为人肺腺癌细胞,属于传代细胞系,可稳定地传代培养。一般用胰酶消化后,加入生长液稀释,以1:2~1:3传代培养都是可行的。
3、a549细胞,该细胞系是1972年由GiardDJ通过肺癌组织移植培养建系的,源自一位58岁的白人男性。A549能通过胞苷二磷脂酰胆碱途径合成富含不饱和脂肪酸的卵磷脂;角蛋白阳性。
4、KRAS突变在腺癌中比较常见。作为非小细胞肺癌的两大驱动基因EGFR和KRAS,各自的特点。KRAS发现早于EGFR,KRAS突变比率在吸烟者中比较高,亚裔人种要高于高加索人种,男性高于女性;而EGFR在不吸烟者中常见。
1、首先,普遍观点是你买的A549是用什么培养基冻存的,就用什么培养基(这个要咨询卖家),当然我们常用1640或者DMEM,养的还是不错。
2、假设A549能够耐受1%的DMSO,那么需要配制100×终浓度的ABCD化合物溶液,并用培养基稀释到终浓度。
3、培养基用的是1640+10%的小牛血清+200u/ml庆大霉素。
4、你应该转是质粒DNA吧,请先确定一下;如果您转的是sirna,但是发现没有转进去,请先观察一下你的细胞情况,很有可能是因为细胞引起的转不成功,一般不介意您直接换转染试剂;转染问题还不可以解决的话可以留言给我。